液相色譜儀系統(tǒng)是由由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。適用于水溶液的體系,又適用于有機(jī)溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時(shí),稱(chēng)為凝膠過(guò)濾色譜,其在生物界的應(yīng)用比較多。也可 用于氨基酸、蛋白質(zhì)的分析,也適合于某些無(wú)機(jī)離子(NO3-、SO42-、Cl-等無(wú)機(jī)陰離子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等無(wú)機(jī)陽(yáng)離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來(lái)分離添加劑,如偶氮染 料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用于石油烴類(lèi)的組成分析。

液相色譜儀和氣相色譜儀之間的區(qū)別:
1、分析對(duì)象之間的區(qū)別
GC:適用于氣化程度高,熱穩(wěn)定性好,沸點(diǎn)低的樣品;但對(duì)于沸點(diǎn)高,揮發(fā)性差,熱穩(wěn)定性差,離子和高聚物的樣品,特別是對(duì)于大多數(shù)生化樣品而言,檢測(cè)不到20%的有機(jī)物質(zhì)。 HPLC:適用于溶解后可制成溶液的樣品(包 括有機(jī)介質(zhì)溶液),它不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,它是一種分子量大,氣化困難,熱穩(wěn)定性差的生化樣品,聚合物和離子。類(lèi)型樣品可用于廣泛的應(yīng)用,占有機(jī)物的80%。
2、流動(dòng)相位差異的差異
GC:流動(dòng)相是惰性的,氣體組分與流動(dòng)相無(wú)親和力,僅與固定相相互作用。
HPLC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相和組分具有協(xié)同作用力,可提高色譜柱的選擇性,提高分離度,對(duì)分離起積極作用。此外,流動(dòng)相有很多種,房間的選擇范圍很廣。改變流動(dòng)相的極性和pH也可以調(diào)節(jié)分離。當(dāng)選擇具有不同 比例的兩種或更多種液體作為流動(dòng)相時(shí),可以提高分離選擇性。
3.運(yùn)行條件的差異
GC:變暖操作。
HPLC:室溫,高壓。
液相色譜儀的使用方法:
1.開(kāi)機(jī),打開(kāi)電腦,打開(kāi)液相色譜各個(gè)模塊的電源,雙擊桌面“儀器—聯(lián)機(jī)",進(jìn)入聯(lián)機(jī)界面,然后排氣。
2.手動(dòng)旋開(kāi)泵處沖洗閥(逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)約1圈),右鍵單擊“泵"圖標(biāo)區(qū)域,選擇“方法?"選項(xiàng),進(jìn)入泵編輯畫(huà)面,設(shè)流速:5ml/min(一般為3-5ml/min),點(diǎn)擊“確定"。 右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“控制?"選項(xiàng),選中“ON", 點(diǎn)擊“確定",則系統(tǒng)開(kāi)始沖洗,直到管線(xiàn)內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無(wú)氣泡為止,(一般為5分鐘),切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道無(wú)氣泡為止。
3. 右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法?"選項(xiàng),設(shè)流速:0ml/min,手動(dòng)旋緊沖洗閥。然后右鍵單擊“泵"圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法?"選項(xiàng),按照方法要求選擇合適比例的流動(dòng)相,設(shè)流速:1.0ml/min。
4. 同理右鍵單擊“柱溫箱",“檢測(cè)器"圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法?"選項(xiàng),按照方法的要求設(shè)置溫度,波長(zhǎng),點(diǎn)擊“控制" 選項(xiàng),“ON"打開(kāi)柱溫箱和檢測(cè)器。